第171章 169非要冲上来挨顿毒打
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第171章 169.非要冲上来挨顿毒打
第二天，秦志峰还在病房忙呢，老师乔梁平就给他打来了电话，“你现在来一趟吧，咱们去找张主任汇报下工作。”
乔梁平想了一夜，决定服软了，没办法，他是快退休了，可还有这么多弟子在这呢，万一张主任真的不讲武德，那他们的处境恐怕会很艰难。
可千万不要小看一个大型三甲医院科主任的能力，你只要你在这个科室里面，他想收拾伱是很轻松的事情，光职称晋升这一块就能把你卡的死死的。
“老乔，你这是？”张主任明知故问道。
“张主任，我糊涂啊。”乔梁平一脸后悔道，“我当时是起了妒忌之心，这才在协会乱说的，这几天我反思了一下，觉得自己的问题很严重，特意过来向你负荆请罪。”
“你看看你，这说的什么话。”张主任笑眯眯道，“我知道你肯定也是为了协会考虑，不过的确是有点考虑不周，这也不是什么大问题嘛。”
“只要及时改正就行了。”
“那我现在就给沈主任打个电话，认个错。”乔梁平说道，他是彻底的不要面子了，没办法，挨打就要立正，这是态度问题，要么死扛，要么就老老实实的服软。
“那没必要，我跟她说一声就行了。”张主任算是给他留了几分颜面。
“那太麻烦张主任了。“乔梁平这会一点心气也没了，“志峰这个带组的事..”
“今年不行了，名额都给老袁了。”张主任出声道，“等明年吧，我先给你签个字，你一会儿拿过去交给医教部。”
出了门，乔梁平感觉好多了，“都是老师的错，没事到处乱树敌，害的你又耽误了一年。”
“就一年，我等得起。”秦志峰松了一口气，他心里倒是没有责怪老师的意思。
沈主任很快就接到了张主任的电话，“这个老张，挺有一套的嘛。”她笑着对赵主任说，“那个乔主任，还敢在我面前倚老卖老，真是给他脸了。”
“就是，明明跟他一毛钱关系都没有，非要冲上来挨顿毒打。张主任的手段我可是听说过的，肯定被收拾的不轻。”赵主任随口说道。
——
X乡这边，胡嘉然正在实验室里面发愁，他们遇到了难题。
融合用饲养层细胞制备还算比较顺利，腹腔巨噬细胞来源方便并且制备简单，最重要的是其中的巨噬细胞具有清除死亡细胞和吞噬细胞碎片的能力，因此一般融合时会选择腹腔巨噬细胞作为饲养层细胞。.
“取7～8周龄雌鼠脱颈椎处死，于70%酒精浸泡消毒，然后超净工作台内用无菌手术剪将小鼠腹部剪开一个小口，镊子剥离周围皮肤以便露出腹腔；”
弃上清，加入1ml完全培养基重悬细胞，然后稀释至所需用量体积，加入到96孔板；
这一步就算完成了。
接下来是免疫鼠脾细胞的准备，这一步虽然不容易，但也没能对胡嘉然他们造成太大的困扰。
细胞融合当天需要取三天前冲击免疫过的小鼠作为免疫脾细胞的来源，一般情况下免疫小鼠的脾脏体积大小是正常小鼠的两倍。
“在超净工作台内用高压灭菌好的手术剪将小鼠胸腔左下侧开一个小口，用镊子摘取脾脏后放于含3~5ml不完全培养基的皿中，剔除周围结缔组织，将脾脏转移至润湿的0.4目筛网中用研磨棒轻柔研磨，加入适量预冷的不完.”
原来胡嘉然挺高兴的，但没想到在融合的时候遇到了麻烦。
高风给的实验流程中是要将骨髓瘤细胞和免疫鼠脾细胞进行融合，可他们进行了多次的实验，结果均以失败告终。
“我感觉是比例的问题。”岳鹏辉说道，“两种细胞的比例在融合的时候起着很关键的作用。”
“还有温度！”一个叫王伟的说道，他是研究生学历，基本功很扎实，胡嘉然早就注意到了这个人。
“还有搅拌的速率。”刚来不到1个月的徐兵也发表了意见，“过快的搅拌速率会导致脾细胞破裂，太慢的话又容易凝固，我觉得速度为25r/min最为合适。”
众人都七嘴八舌的说了起来，实验到这个地方卡住了，都1周多了，一点进度也没有，大家都很着急。
“说的都挺有道理。”胡嘉然做了总结，“那接下来该怎么办呢？”
“能怎么干啊？往死里干呗。”王亮喊了起来，“四点睡，六点起，阎王夸我好身体！”
胡嘉然突然对这个逗比满意极了，“加班费发双倍的。”他同时使出了无坚不摧的钞能力。
半月后.
“这两天放假，大家好好歇歇。”胡嘉然很兴奋，但声音中明显透露着一股子虚弱。
他强打精神，开始把实验的详细流程给记录了下来：
充分打散沉淀，将1ml经过32℃预热的50% PEG匀速加入离心管中（用1ml的移液器，5 min内加完），期间用移液器枪头轻柔搅拌；
持续缓慢的用枪头搅拌3~4分钟；
匀速加入1ml经过37℃预热的不完全培养基（1 min内加完），期间用移液器枪头轻柔搅拌；
再匀速加入3ml经过37℃预热的培养基（3 min内加完），期间用移液器枪头轻柔搅拌；
融合后24小时内补加含HAT的选择性补液培养基，50μl/well；
补液两天后进行第一次半换液，每孔吸出60～80μl的培养基，第一次半换液培养基内HAT含量减半，50μl/well；
再过两天后进行第二次半换液，每孔吸出60～80μl培养基，换成含HT的培养基，50μl/well。
“你要不歇歇再弄吧。”齐楠楠在一旁劝道，“我这段时间真怕你猝死了。”
“怎么可能？”胡嘉然头都没有抬，“我虎着呢。还有，齐楠楠，我能不能给你提个建议啊？”
“你说。”
“就是你处死小白鼠的时候，能不能不要老是露出那种变态的笑容啊？”他嫌弃道，“连王亮那么变态的人都说你不正常。”
“有病吧，你们！”齐楠楠不乐意了，“我杀几个老鼠我招谁惹谁了？那下次我面无表情好了。”
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第171章 169.非要冲上来挨顿毒打
第二天，秦志峰还在病房忙呢，老师乔梁平就给他打来了电话，“你现在来一趟吧，咱们去找张主任汇报下工作。”
乔梁平想了一夜，决定服软了，没办法，他是快退休了，可还有这么多弟子在这呢，万一张主任真的不讲武德，那他们的处境恐怕会很艰难。
可千万不要小看一个大型三甲医院科主任的能力，你只要你在这个科室里面，他想收拾伱是很轻松的事情，光职称晋升这一块就能把你卡的死死的。
“老乔，你这是？”张主任明知故问道。
“张主任，我糊涂啊。”乔梁平一脸后悔道，“我当时是起了妒忌之心，这才在协会乱说的，这几天我反思了一下，觉得自己的问题很严重，特意过来向你负荆请罪。”
“你看看你，这说的什么话。”张主任笑眯眯道，“我知道你肯定也是为了协会考虑，不过的确是有点考虑不周，这也不是什么大问题嘛。”
“只要及时改正就行了。”
“那我现在就给沈主任打个电话，认个错。”乔梁平说道，他是彻底的不要面子了，没办法，挨打就要立正，这是态度问题，要么死扛，要么就老老实实的服软。
“那没必要，我跟她说一声就行了。”张主任算是给他留了几分颜面。
“那太麻烦张主任了。“乔梁平这会一点心气也没了，“志峰这个带组的事..”
“今年不行了，名额都给老袁了。”张主任出声道，“等明年吧，我先给你签个字，你一会儿拿过去交给医教部。”
出了门，乔梁平感觉好多了，“都是老师的错，没事到处乱树敌，害的你又耽误了一年。”
“就一年，我等得起。”秦志峰松了一口气，他心里倒是没有责怪老师的意思。
沈主任很快就接到了张主任的电话，“这个老张，挺有一套的嘛。”她笑着对赵主任说，“那个乔主任，还敢在我面前倚老卖老，真是给他脸了。”
“就是，明明跟他一毛钱关系都没有，非要冲上来挨顿毒打。张主任的手段我可是听说过的，肯定被收拾的不轻。”赵主任随口说道。
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X乡这边，胡嘉然正在实验室里面发愁，他们遇到了难题。
融合用饲养层细胞制备还算比较顺利，腹腔巨噬细胞来源方便并且制备简单，最重要的是其中的巨噬细胞具有清除死亡细胞和吞噬细胞碎片的能力，因此一般融合时会选择腹腔巨噬细胞作为饲养层细胞。.
“取7～8周龄雌鼠脱颈椎处死，于70%酒精浸泡消毒，然后超净工作台内用无菌手术剪将小鼠腹部剪开一个小口，镊子剥离周围皮肤以便露出腹腔；”
弃上清，加入1ml完全培养基重悬细胞，然后稀释至所需用量体积，加入到96孔板；
这一步就算完成了。
接下来是免疫鼠脾细胞的准备，这一步虽然不容易，但也没能对胡嘉然他们造成太大的困扰。
细胞融合当天需要取三天前冲击免疫过的小鼠作为免疫脾细胞的来源，一般情况下免疫小鼠的脾脏体积大小是正常小鼠的两倍。
“在超净工作台内用高压灭菌好的手术剪将小鼠胸腔左下侧开一个小口，用镊子摘取脾脏后放于含3~5ml不完全培养基的皿中，剔除周围结缔组织，将脾脏转移至润湿的0.4目筛网中用研磨棒轻柔研磨，加入适量预冷的不完.”
原来胡嘉然挺高兴的，但没想到在融合的时候遇到了麻烦。
高风给的实验流程中是要将骨髓瘤细胞和免疫鼠脾细胞进行融合，可他们进行了多次的实验，结果均以失败告终。
“我感觉是比例的问题。”岳鹏辉说道，“两种细胞的比例在融合的时候起着很关键的作用。”
“还有温度！”一个叫王伟的说道，他是研究生学历，基本功很扎实，胡嘉然早就注意到了这个人。
“还有搅拌的速率。”刚来不到1个月的徐兵也发表了意见，“过快的搅拌速率会导致脾细胞破裂，太慢的话又容易凝固，我觉得速度为25r/min最为合适。”
众人都七嘴八舌的说了起来，实验到这个地方卡住了，都1周多了，一点进度也没有，大家都很着急。
“说的都挺有道理。”胡嘉然做了总结，“那接下来该怎么办呢？”
“能怎么干啊？往死里干呗。”王亮喊了起来，“四点睡，六点起，阎王夸我好身体！”
胡嘉然突然对这个逗比满意极了，“加班费发双倍的。”他同时使出了无坚不摧的钞能力。
半月后.
“这两天放假，大家好好歇歇。”胡嘉然很兴奋，但声音中明显透露着一股子虚弱。
他强打精神，开始把实验的详细流程给记录了下来：
充分打散沉淀，将1ml经过32℃预热的50% PEG匀速加入离心管中（用1ml的移液器，5 min内加完），期间用移液器枪头轻柔搅拌；
持续缓慢的用枪头搅拌3~4分钟；
匀速加入1ml经过37℃预热的不完全培养基（1 min内加完），期间用移液器枪头轻柔搅拌；
再匀速加入3ml经过37℃预热的培养基（3 min内加完），期间用移液器枪头轻柔搅拌；
融合后24小时内补加含HAT的选择性补液培养基，50μl/well；
补液两天后进行第一次半换液，每孔吸出60～80μl的培养基，第一次半换液培养基内HAT含量减半，50μl/well；
再过两天后进行第二次半换液，每孔吸出60～80μl培养基，换成含HT的培养基，50μl/well。
“你要不歇歇再弄吧。”齐楠楠在一旁劝道，“我这段时间真怕你猝死了。”
“怎么可能？”胡嘉然头都没有抬，“我虎着呢。还有，齐楠楠，我能不能给你提个建议啊？”
“你说。”
“就是你处死小白鼠的时候，能不能不要老是露出那种变态的笑容啊？”他嫌弃道，“连王亮那么变态的人都说你不正常。”
“有病吧，你们！”齐楠楠不乐意了，“我杀几个老鼠我招谁惹谁了？那下次我面无表情好了。”
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